• 卡口瓶

    详细信息

     型号:50ml    
    德国得乐NBB系列培养基
    包装规格:
      德国德乐NBB-A培养基,250ml/瓶
      德国德乐NBB-B培养基,250ml/瓶
      德国德乐NBB-C培养基,250ml/瓶
      德国德乐NBB-P培养基(粉状),300克/包
     
    NBB---专门用于检测啤酒有害菌的培养基
    NBB系列卡口瓶是专门为了检测啤酒有害菌而开发研制的。针对啤酒厂中不同的检测祥品,有三种不同形式的NBB培养基可供选泽:NBB--Agar(NBB-琼脂培养基,以下简称NBB-A),
    NBB--Broth(NBB--培养液,以下简称NBB-B),NBB--Concentrate(NBB-浓缩液,以下简称NBB-C)。由于NBB系列培养基有不同的浓度,无论是大量浑浊样品或含酵母数量较多的样品,还是有少量有害菌存在的样品,NBB都能将其检出。清亮的啤酒和冲洗水样经过膜过滤后可以使用NBB-A进行检测;酵母样品可以使用NBB--B进行检测(列如0.5ml—1.0ml纯种培养酵母、回收酵母、接种酵母、罐底酵母或瓶装啤酒内的酵母沉淀样品加入10-20mlNBB--B,进行培养):含有酵母的啤酒(如发酵液、未过滤的啤酒、或德国巴伐利亚小麦啤酒)可以用直接加入5%NBB--C的方法进行检测。
    NBB系列培养基含有丰富的营养物质和促进啤酒有害菌生长的物质,以及模拟啤酒有害菌生长繁殖环境的有效成分。这些特点使NBB产品三种形式中的任何一种都可以快速可靠的检测出任何啤酒有害菌。培养时间的快慢取决于微生物起始细胞数、微生物种属、啤酒污染程度、微生物的生理条件等几点因素。对于较为严重的污染,1天的培养就足够了,对于轻微的污染或生长非常缓慢的微生物(如林特奈乳酸杆菌),多数情况需要几天的时间。经验得出,为了达到切实可靠的检测结果,培养温度应在25-28℃,NBB--A应在培养5天以后做结果鉴定,NBB--B和NBB--C则需要7—12天。与其他检测方法相比较(在几天时间内)和一般的保质期样品(在几周时间内),NBB产品更快速有效,特别是针对于轻微的污染(样品中只有1个微生物)和难以检测出的啤酒有害菌。2001年,NBB系列产品的生长促进物质和抑剞因素被进行了改进,新的NBB产品,为您节省更多时间。   
    在正确的培养条仵下,所有啤酒有害菌都可以在NBB上清楚的生长,而那些无害的伴生细菌将被抑制。NBB产品对有害菌的选择性使其能够适用于不同种类的样品。
    综合检测计划:对污染进行追踪检测的安全记录 

    酵母样品的检测
    为了有效的检测出酵母样品中所有危害性微生物(包括啤酒必然有害菌、潜在有害菌、间接啤酒有害菌、微需氧菌以及一些指示性细菌),要求在无菌环境下处理酵母。前面我们提到选择性问题,NBB--B专门用于检测醋酸菌(如巴氏醋酸杆菌Acetbacter pasteurianus、葡萄糖酸菌Gluconobaoter frateurii)和―些格兰氏阳性菌、肠细菌(列如Enterobaoterspecies, Pantea  agg|omerans,obesumbacterium proteus) 以及过氨化氢酶阴性的小球菌或乳酸球菌。对于上述细菌,NBB-B的选择性*高。
    如果污染很严重,而且是由典型的啤酒有害菌引起的,NBB产品中的指示剂会由红色变为黄色。有些时候样品变色不明显,这是因为污染很轻微或是酵母老化、罐底酵母自溶产碱影晌指示剂变色,所以在给出*终结果之前必须对样品进行镜检。由于啤酒有害菌的生长很迅猛,因此很容易在显微镜下被识别出来。分散的细菌细胞,例如在600倍的显微镜下,若在10个视野中发现了1-3个杆菌,这些细菌不是已死就是属于无害的菌种,或许可能在酵母培荞以前就出现了。在不能确定啤酒是否含有害菌的情况下,建议将此样品用合适的接种环接种到新的NBB-B中,如果有啤酒有害菌存活的话,通过二次培养,它们会迅速生长,指示剂将会在2天内变黄。
    进行如上实验*合适的容器是带透气塞子的试管(例如塑料泡沫塞)。为防止增加培养基不必要的热敏感性,建议使用已灭茵好的容器(避免再次加热),这样可以将待检样品从取样瓶在火焰下直接灌入培养容器。对于大量的较厚稠的酵母样品(1-2ml),用50ml带可翻转塞子的瓶子(sssBs)很合适,加入20-30mlNBB-B(检测酵母样品中的啤酒腐败菌)。对于更大量酵母样品的检测(10m|左右),操作时要摇晃均匀。
    灭菌棉签(有的带可旋转的盖子)也是一种非常实用方便的检测酵母的方法。用灭菌棉签从各种不同的酵母罐取酵母或罐底样品,约0.5ml,加入约70%的NBB-B,不要将盖子拧紧,以便在培养时酵母产生的二氧化碳能够溢出。如果酵母量太多或酵母沉淀太稠,而污染又很轻微,样品中一些啤酒腐败微生物的细胞可能无法与NBB-B接触,如果这样则建议适当摇晃试管(培养容器),将沉淀摇起(例如可使用振荡器对样品进行缓慢的振荡)。在检测酵母样品时,无需在绝对厌氧的条件下培养,因为酵母本身在发酵开始时产生的二氧化碳给样品提供了良好的厌氧环境。而经过很短时间的培养之后,培荞基中的选择性成分就会抑制培养酵母的生长,这时培养基中的营荞物质和促进生长物质将会很好的发挥作用,并对啤酒有害菌的生长没有任何限制和抑制。

     
    未过滤啤酒的检测
    使用NBB-C卡口瓶可以非常容易地检测前酵液、后酵液或含酵母的小麦啤酒。对于浑浊的祥品(含有酵母),可使用180ml取样瓶,加入5%的NBB-C,*后在必要时用无菌水将取样瓶补满。为了避免过高的压力(浑浊样品中的酵母产生二氧化碳使压力升高),样品瓶的盖子在培养刚开始的时候不要扣紧。这些样品表现出很高的选择性(与保质期样品相比),但这种选择性会受到无菌水加入量的影响。因为培养环境中啤酒的含量比较高,无需在厌氧的条件下培养。值得注意的是NBB-C产品总是与啤酒一起培养,如果没有啤酒,那么培养基就失去了啤酒的特殊的选择性。在大多数情况下操作如下:取120-150ml未杀菌的啤酒,加入约5%的NBB-C后,用无菌水将样品瓶补满。这样做的优点是使酒花苦昧物质(生长抑制物质)的浓度大大被减小了,而且这种做法毫不费力。样品需要在27℃下培养5-7天,其中酵母和培荞酵母的生长都被抑制了, (NBB-C应在加入被检样品后马上加入,或至少应在被检样品干燥之前加入)。在这个没有竞争的环境里,啤酒有害菌可以很好的生长和繁殖。由于NBB-C产品里不含指示剂,必须对培养后的样品进行镜检。与我们前面所提到的NBB-B样品的结果鉴定一样,只有毫无质疑的微生物镜检结果才能被确认:这要求许多可疑的细菌在每一个视野里都被看到。例如,在600倍的显微镜下,在10个视野中发现了1个杆菌或球菌,因为没有明显的增殖,所以这些细菌一般是死的或是无害的。对于不能确定的结果,建议转移到NBB-B中做二次培养。尽管通常已污染的样品在使用NBB-C进行培荞时会出现浊度增加或产生沉淀的现象,但是对它们进行*终的镜检是完全有必要的。一些啤酒有害菌(如足球菌)在酵母沉淀中生长的很好。如果是数量很大的样品(如1-2升啤酒),建议进行如下处理:首先将上清液进行膜过滤,然后将过滤膜放入带可翻转盖子的样品瓶中(sssBs),加入5%的NBB-C。再将剩下的酵母沉淀摇起,缓慢的倒入样品瓶,*后用无菌水将样品瓶补满。使用NBB-B也可以同样简单可靠的实现对未过滤啤酒的检测。将未过滤啤酒倒入一个已灭菌的容器或其他合适的样品瓶,等到形成一定程度的酵母沉淀(大多数可能出现沉淀的啤酒有害菌和酵母在一起)后将上清夜倒掉。用巴氏杀菌过的吸管或灭菌棉签取约0.5ml酵母悬浮液,操作和培养同“酵母样品的处理”。这种方法选择性稍有所降低,但所需的培养时间明显缩短了

    左: 培养酵母引起的浑浊              对应不同危害程度的啤酒有害菌进行选择性检测
    右: 啤酒有害菌引起的浑浊
     
    过滤后啤洒的检测
    清酒常常先做膜过滤处理。将过滤膜放在NBB--A上,放入厌氧罐(或充满二氧化碳的干燥容器),在27℃进行厌氧培养。为了达到较好的气体交换,培养皿的上盖应较为宽松。
    啤酒有害菌通常会形成扁平的菌落,而且培荞基的颜色会变黄。培养罐里残留的小部分空气会阻碍像果胶杆菌和巨球菌这样的严格厌氧菌的生长,并同时允许好氧菌轻微的生长(多数为醋酸杆菌)。另外,过滤膜中的气泡会削弱营养物质和生长促进物质的传播,因此,过滤膜也经常放入NBB-B卡口瓶中,在厌氧罐里培养,样品瓶要选用可透气的盖子。
    处理样品的其它方法:
    ●将已经灭菌的瓶装啤酒(保质期架上的样品即可)倒入已灭菌好的50ml 的取样瓶(SSSB)中,灌装到标准刻度(约瓶颈处)。将过滤膜放入取样瓶中,加入NBB-B将取样瓶补满。这种方法对于检测啤酒腐败菌包括有害酵母(浑浊,沉淀,但无颜色变化)十分适宜。如果需处理的样品数量很大,在样品瓶中倒入40ml,将剩余的做膜过滤,然后将过滤膜放入样品瓶,加入NBB-B将样品瓶补满。
    ●从生产线上取一瓶啤酒,加入10-15mlNBB--B,然后封盖。在保质期培养箱中培养10天(代替6周),可检出发酵酵母(包括培养酵母和异类酵母),产生浑浊,沉淀,但无颜色变化。
    ●在已过滤啤酒中加入5%的NBB-C,用无菌水灌满样品瓶或进行厌氧培养。可以检测出任何啤酒有害菌,并抑制酵母的生长。
     
    麦汁和水样中啤酒有害菌的检测
    50ml待检样品(例如接种麦汁或冲洗水)倒入180m丨带可翻转盖子的样品瓶(SSSB),然后加入8ml NBB-C用巴氏杀菌过的啤酒将样品瓶补满(主要是为了增加培荞基的选择性),于27℃下培养5天。
    压缩空气和二氧化碳的检测
    取样时应注意,气体要缓慢的(需约1分钟)进入NB-B(例如在(SSSB)中培荞)。操作时不能太快或过于猛烈,否则会将有可能出现的啤酒有害菌吹掉了。

     

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